细胞爬片制备中常见问题及解决方案

　　细胞爬片制备中常见问题及解决方案

　　盖玻片与细胞爬片的区别

　　材质与设计‌

　　盖玻片：普通玻璃材质，需手动剪裁或处理(如酸洗、高压灭菌)。

　　细胞爬片：专用玻片，表面经TC处理或阳离子电荷修饰，可直接贴附细胞，无需额外包被。

　　使用场景‌

　　盖玻片：通用性强，但需预处理，适合简单实验。

　　细胞爬片：专为细胞培养优化，贴壁更牢固，适合免疫荧光、凋亡检测等高精度实验。

　　操作便捷性‌

　　盖玻片：操作繁琐(如酸洗、灭菌)，易产生气泡或脱片。

　　细胞爬片：开包即用，减少预处理步骤，实验效率更高。

　　细胞爬片制备步骤

　　玻片处理‌

　　酸泡24小时，流水冲洗，蒸馏水浸泡，高压灭菌。

　　或用70%乙醇浸泡后火焰烤干(少量玻片)‌。

　　细胞接种‌

　　贴壁细胞：将玻片放入培养皿，接种细胞悬液，静置30分钟‌。

　　悬浮细胞：直接滴加细胞悬液，静置4小时‌。

　　固定与保存‌

　　4%多聚甲醛固定10-20分钟，PBS轻柔洗涤。

　　避免干燥，及时固定或染色‌。

　　常见问题及解决方案

　　脱片‌

　　原因：细胞附着力差、洗涤过猛、固定不当‌。

　　解决：使用多聚赖氨酸包被玻片，优化PBS冲洗方式‌。

　　背景高‌

　　原因：封闭不充分、抗体浓度过高‌。

　　解决：延长封闭时间，调整抗体稀释比例‌。

　　细胞贴壁不均‌

　　原因：玻片未处理或细胞密度过高‌。

　　解决：用多聚赖氨酸包被，控制细胞密度‌。

　　注：以上仅供参考，本试剂仅供科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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